Высоцкая обитель славна не только своими святынями — просияла она и своими подвижниками-иноками, некоторые из которых прославлены Православной Церковью в лике святых, к их молитвенному предстательству прибегают многие верующие.

Первым игуменом Высоцкой обители был поставлен Преподобным Сергием Радонежским преподобный Афанасий Высоцкий (Старший) — подвижник высочайшей духовной жизни, прозорливец и великий молитвенник. После того, как он вместе с Митрополитом Московским и всея Руси Киприаном отбыл в 1387 году в Константинополь, где и остался до конца дней своих, его приемником по управлению обителью стал его же ученик преподобный Афанасий Высоцкий (Младший). Сравнительно недолго управлял он обителью и от великих трудов и подвигов почувствовал, как пишется в его житии, «старческое изнеможение» и преставился ко Господу в 1396 году.

На его могиле стали происходить многочисленные чудеса, свидетелями которых были не только братия монастыря, но и многие богомольцы и паломники. Мощи его были обретены в 1994 году и почивают ныне в Покровском храме монастыря. Третьим игуменом обители был ученик и родственник Преподобного Сергия Радонежского преподобный Никита. Подвизался здесь и приемник великогоСергия преподобный Никон Радонежский, постигая монашескую науку под руководством преподобного Афанасия (Старшего), именно здесь он был пострижен в монахи и получил священный сан. По мнению исследователей в Высоцкой обители проходил иноческий искус и обучался иконописи преподобный Андрей Рублев, а учеником преподобного Никиты в течение многих лет был преподобный Пафнутий, основатель Боровского монастыря. В 1825 — 26 годах в братии Высоцкого монастыря состоял знаменитый монах-прорицатель Авель Вещий, который имел удивительный дар пророчества и предсказывал многие события в жизни Российских Императоров. А сколько неизвестных монахов-подвижников возносили здесь ежедневно в продолжение многих столетий свои святые молитвы ко Господу и Его Пречистой Матери! Монастырская земля освящена их подвигами и молитвами, которые они и поныне возносят уже в Горних Селениях Престолу Божию.